L'utilisation du microscope optique en mycologie et lichénologie
Le microscope optique à fond clair
Jean-Pierre GAVERIAUX

 

Les pionniers comme Elias Magnus FRIES (1794-1878) n’avaient pas de microscope ; ils ont étudié uniquement les caractères macroscopiques des champignons (champignons lichénisés inclus) pour établir les bases de la mycologie. Les premiers mycologues à utiliser un microscope, par exemple Lucien QUÉLET (1832-1899), disposaient d’un matériel rudimentaire, peu précis et les observations grossières qui étaient réalisées conduisaient souvent à des conclusions inexactes.

Avec l’avènement d’un matériel optique plus performant, le 20ème siècle a permis à la mycologie de progresser considérablement et si, actuellement les reconstitutions phylogénétiques basées sur l’étude des ADN remettent en question certaines parties de la systématique classique, établie à partir des études en microscopie optique, le microscope à fond clair reste l’outil de base du mycologue et du  lichénologue.
C'est le principal outil pour vous permettre de progresser dans les clés de détermination, celles-ci,
faisant pratiquement toujours appel à l'observation de caractères non décelables à l’œil nu (les seuls à considérer si vous étudier les micromycètes).


00. Le microscope : l'outil indispensable au mycologue
01. Le principe de fonctionnement du microscope optique à fond clair
02. La partie mécanique du microscope
03. Le dispositif d'éclairage
04  La partie optique : Aberrations chromatiques et géométriques
05. Les objectifs
06. Les condenseurs
07. Les oculaires
08. Principaux accessoires
09. Entretenir son microscope


   

1590

Zacharias découvre le principe du microscope composé.

1667

Bonnani invente l’éclairage par transparence (suite à l’établissement des lois de la réfraction par Descartes).

1683

Leeuwenhoek construit des loupes (improprement appelées microscopes) permettant de grossir jusqu’à 275 fois.

1740

Hall fabrique les premiers objectifs achromatiques.

1820

Création d’optiques performantes par Marzoli, Tully et Dellond (la supériorité du microscope sur la loupe va pouvoir enfin s’imposer).

1850

Amici invente la technique de l’immersion à eau (ensuite on a utilisé la glycérine puis l’huile de cèdre).

1863

Construction de l’ancêtre du microscope moderne muni d’un condenseur à fond noir par Duboscq et Nachet.

1875

Abbe montre l’influence de l’ouverture numérique sur le pouvoir séparateur d’un objectif. Collaboration avec Zeiss et invention des premiers apochromatiques.

1893

Köhler met au point un système d’éclairage plus performant en plaçant devant la source lumineuse un collecteur muni d’un diaphragme.

1904

Mise au point du microscope à lumière ultraviolette par Köhler et Rohr qui utilisent le quartz et la fluorine.

1904

Siedentopf réalise le premier microscope à fluorescence.

1935

Zernicke met au point le microscope à contraste de phase.

1952

Nomarski invente le microscope interférentiel.

Quelques dates importantes dans l’histoire du microscope optique

 

   

01 - Oculaires
02 - Tubes porte-oculaires réglables
03- Tête binoculaire tournante
04 - Vis de blocage de la tête binoculaire
05 - Tourelle revolver porte-objectifs
06 - Objectif (parafocalité de 45 mm)
07 - Potence verticale
08 - Platine avec chariot incorporé
09 - Boutons de commande du chariot
10 - Condenseur d’Abbe à 3 lentilles
11 - Sous-platine mobile verticalement
12 - Vis de fixation du condenseur
13 - Vis de centrage du condenseur
14 - Lentille escamotable
15 - Réglage en hauteur du condenseur
16 - Diaphragme d’ouverture
17 - Porte-filtre escamotable
19 - Interrupteur et réglage de la
       puissance de l’éclairage incorporé
20 - Prise du cordon d’alimentation
21 - Mise au point rapide bilatérale
22 - Mise au point micrométrique bilatérale
23 - Base du statif (contenant l’éclairage)
24 - Collecteur avec diaphragme de champ
25 - Cavité pour filtres
26 - Chariot mobile
27 - Écartement réglable des oculaires
28 - Indicateur d’écartement interpupillaire

Les constituants d’un microscope optique binoculaire (Will - Wetzlar)

 
Quelques types de microscopes
   

Le microscope monoculaire
à mise au point par déplacement du tube optique,
oculaire muni d'un micomètre
et objectif x100 à immersion


C'est le plus simple et le moins cher des microscopes. S'il possède un condenseur et un objectif x100 à immersion, il peut vous servir en mycologie toutefois l'observation avec un seul
œil est très rapidement fatigante. Vous pouvez l'acheter si vous ne faites de la microscopie que de temps en temps et que vous ne désirez pas investir dans du matériel optique de laboratoire.

 

Le microscope binoculaire
à mise au point par déplacement de vertical de la platine


Avec 4 objectifs achromatiques x4, x10, x20, x100 à immersion, un oculaire micrométrique et un éclairage d'intensité réglable, il vous permet de vous lancer sérieusement dans l'étude microscopique des champignons.
C'est le type de microscope utilisé le plus couramment par les mycologues.
De nombreux modèles existent et les prix augmentent très significativement en fonction de la qualité des optiques, du système d'éclairage et de la précision des mécanismes de déplacement de la platine.

Le microscope trinoculaire avec
5 objectifs plan-achromatiques x4, x10, x20, x40, x100
et éclairage halogène avec variateur de puissance


Ce matériel plus élaboré est surtout destiné aux mycologues qui désirent pratiquer la photomicrographie.
Un appareil photo (argentique ou numérique) se fixe sur le tube situé au sommet de la tête trinoculaire tandis que les 2 oculaires libres sont utilisés pour l'observation traditionnelle.
Quant aux optiques plans, elles permettent d'obtenir des images nettes au centre mais également à la périphérie du champ optique.

Le microscope trinoculaire de recherche avec
5 ou 6 objectifs planapochromatiques
et de nombreux accessoires interchangeables


Ces microscopes très perfectionnés, destinés aux observations les plus précises, permettent d'aborder toutes les techniques de microscopies avec une conception modulaire et un vaste choix d'accessoires divers (contraste de phase, contraste interférentiel de Nomarski, fluorescence en lumière réfléchie...). Leurs prix sont toutefois dissuasifs pour les mycologues amateurs et ces microscopes sont destinés aux laboratoires de recherche.
Quatre grandes marques se trouvent actuellement sur ce marché du haut de gamme de la microscopie optique : Leica, Nikon, Olympus et Zeiss.



00. Le microscope : l'outil indispensable au mycologue
01. Le principe de fonctionnement du microscope optique à fond clair
02. La partie mécanique du microscope
03. Le dispositif d'éclairage
04  La partie optique : Aberrations chromatiques et géométriques
05. Les objectifs
06. Les condenseurs
07. Les oculaires
08. Principaux accessoires
09. Entretenir son microscope


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